题目
什么是细胞凋亡?如何检测?表观遗传修饰在细胞凋亡中的作用?
提问时间:2021-03-14
答案
细胞凋亡(apoptosis)是指细胞在一定的生理或病理条件下,受内在遗传机制的控制自动结束生命的过程.
关于检测方法,这是我在期末考试自己总结的,并不是从网络上贴过来的!
1,形态观察
坏死细胞:细胞膨胀,细胞质膜裂解,细胞器膨大,溶酶体破裂,水解酶释放到细胞溶质中使细胞内溶物分解导致细胞崩解,DNA随机断裂成不规则碎片,引起炎症.
凋亡细胞:细胞不膨胀,保持内部结构,使正常分散的染色质凝集在细胞核被膜内侧呈环状或块状.细胞质膜完整,细胞器维持原状,细胞质膜和核被膜出泡,有时出泡的部分缢缩成凋亡小体(内含部分凝集的染色质)并与细胞分开,它被巨噬细胞或其它周围细胞吞噬而不表现炎症.
2,DNA电泳:DNA酶Ⅰ活化使核小体之间的连接断裂,裂解成长短不同的DNA片断,长度为180-200bp的整数倍,表现为DNA ladder电泳图像.
3,TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记).在末端转移酶催化下事先被荧光标记的dUTP连接在断裂末端,如果DNA发生多点断裂,则可观察到荧光点.
4,流式细胞分析:发生凋亡的细胞DNA含量可能少于G1期,或可引起感光减弱,表现为凋亡细胞出现亚二倍体峰,即在正常细胞的二倍体峰之前出现一个峰.
5,电泳:单个细胞裂解悬浮于琼脂糖凝胶,凋亡细胞会出现“彗星状脱尾”.
6,相关基因检测.
关于检测方法,这是我在期末考试自己总结的,并不是从网络上贴过来的!
1,形态观察
坏死细胞:细胞膨胀,细胞质膜裂解,细胞器膨大,溶酶体破裂,水解酶释放到细胞溶质中使细胞内溶物分解导致细胞崩解,DNA随机断裂成不规则碎片,引起炎症.
凋亡细胞:细胞不膨胀,保持内部结构,使正常分散的染色质凝集在细胞核被膜内侧呈环状或块状.细胞质膜完整,细胞器维持原状,细胞质膜和核被膜出泡,有时出泡的部分缢缩成凋亡小体(内含部分凝集的染色质)并与细胞分开,它被巨噬细胞或其它周围细胞吞噬而不表现炎症.
2,DNA电泳:DNA酶Ⅰ活化使核小体之间的连接断裂,裂解成长短不同的DNA片断,长度为180-200bp的整数倍,表现为DNA ladder电泳图像.
3,TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记).在末端转移酶催化下事先被荧光标记的dUTP连接在断裂末端,如果DNA发生多点断裂,则可观察到荧光点.
4,流式细胞分析:发生凋亡的细胞DNA含量可能少于G1期,或可引起感光减弱,表现为凋亡细胞出现亚二倍体峰,即在正常细胞的二倍体峰之前出现一个峰.
5,电泳:单个细胞裂解悬浮于琼脂糖凝胶,凋亡细胞会出现“彗星状脱尾”.
6,相关基因检测.
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