题目

在用比色法检测细胞活力实验中可否用其他染料代替MTT

提问时间：2021-03-06

答案

我找到一个不一样的方法,不知是否有帮助：
MTT法
MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法.其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中,而死细胞无此功能.二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量.在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比.MTT法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、细胞增殖测定、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等.MTT法的特点是灵敏度高、价格经济实惠.不过,MTT法是有缺陷的,是因为MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水,需被溶解后才能检测.这不仅使检测时的工作量增加,也会对实验结果的准确性产生影响,而且溶解甲瓒的有机溶剂对实验者也有损害.

CCK-8法(或称WST-8法)细胞活性检测方法简介
CCK-8细胞活性检测试剂中含有WST-8,化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐],它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan）.生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比.用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量.该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等.CCK-8法的优点： 1、使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂； 2、CCK-8法能快速检测； 3、CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度； 4、CCK-8法的重复性优于MTT法； 5、CCK-8法对细胞毒性小； 6、CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用. CCK-8法的缺点: 1、与MTT法相比,CCK-8和XTT的价格比较贵. 2、CCK-8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加.