题目

乙醇引起蛋白质变性实验的实验步骤.
如题.

提问时间：2020-10-25

答案

乙醇引起的变性与沉淀
取3支试管,编号.依顺序加入试剂：
试管一：5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、pH4.7缓冲溶液各1mL
试管二：5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、0.1mol/L的NaOH溶液各1mL
试管三：5%卵清蛋白溶液、95%乙醇、0.1mol/L的HCl溶液各1mL
振摇混匀后,观察各管有何变化.放置片刻,向各管内加水8毫
升,然后在第2、3号管中各加一滴甲基红．再分别用0.1当量／升醋酸溶液及0.1当星／升碳酸钠溶液中和之.观察各管颜色的变化和沉淀的生成.每管再加0.1当量／升盐酸溶液数滴,观察沉淀的再溶解.解释各管发生的全部现象.
首先,只有高浓度乙醇长时间作用才会使蛋白质变性,低浓度的乙醇会使蛋白质的亲水结构（氢键）破坏而沉淀析出,类似于盐析.其次,变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了,应为变性即意味着结构的永久改变.你的试验中乙醇的最终浓度是95%*1ml/3ml=32%,而且最后蛋白会再溶解.因此,这个实验不足以证明蛋白质变性.
后来继续加盐酸是为了使pH值偏离等电点,增大蛋白质的溶解度,进而使蛋白质再溶解.