聚合酶链式反应(PCR技术)是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术，反应系统中包括微量样品DNA、DNA聚合酶、引物、足量的4种脱氧核苷酸及ATP - 高中生物试题 - 超级试练试题库

题目

题型：0107 模拟题难度：来源：

聚合酶链式反应(PCR技术)是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术，反应系统中包括微量样品DNA、DNA聚合酶、引物、足量的4种脱氧核苷酸及ATP等。反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板，故DNA数以指数方式扩增，其简要过程如图所示。

(1)某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A：G：T：C=1：2：3：4，则经过PCR仪五次循环后，将产生个______DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是__________个。
(2)分别以不同生物的DNA样品为模板合成的各个新DNA之间存在差异，这些差异是_____________。
(3)由于DNA上的“遗传因子”基本都是符合孟德尔的遗传规律的，因此人类可以利用PCR技术合成的DNA进行亲子鉴定，其原理是：首先获取被测试者的DNA，并进行PCR扩增，取其中一样本DNA用限制性内切酶切成特定的小片段，放进凝胶内，用电泳推动DNA小片段分离，再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会凝聚在一起，然后利用特别的染料在X光下，便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码。每个人的条码一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲的条码吻合。
①．限制性内切酶能将DNA样品切成特定的小片段，这主要体现了酶的________。
A．专一性 B．高效性 C．多样性 D．作用条件温和
②．2002年6月，我国第一张18位点的“基因身份证明”在湖北武汉诞生。人的“基因身份证明”是否终身有效？_______，理由是_________。
(4)请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处：①．___________。②．__________。③．__________。

答案

(1)32 6200
(2)碱基(脱氧核苷酸)的数目、比例和排列顺序不同
(3)A 是　因为同一个体的不同生长发育阶段和不同组织的DNA是相同的，所以它有高度的个体特异性和稳定性
(4)①．PCR技术以DNA的两条单链为模板合成子代DNA，转录以DNA的一条单链为模板合成RNA
②．PCR技术的原料为脱氧核苷酸，转录的原料是核糖核苷酸
③．二者反应时的催化酶不同(答案合理即可)

核心考点

试题【聚合酶链式反应(PCR技术)是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术，反应系统中包括微量样品DNA、DNA聚合酶、引物、足量的4种脱氧核苷酸及ATP】；主要考察你对制备和应用固相化酶等知识点的理解。[详细]

举一反三

T-DNA可随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子(称为T₁代)。
(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除_____，因为后者产生的____会抑制侧芽的生长。
(2)为筛选出已转化的个体，需将T₁代播种在含_____的培养基上生长，成熟后自交，收获种子(称为T₂代)。
(3)为筛选出具有抗盐性状的的突变体，需将T₂代播种在含____的培养基上，获得所需个体。
(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与____植株进行杂交，再自交____代后统计性状分离比。
(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性____。
(6)根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取__________植株的DNA，用限制酶处理后，再用__________将获得的DNA片段连接成环(如下图)，以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_________作为引物进行扩增，得到的片段将用于获取该基因的全序列信息。

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聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是[ ]
A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D．PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高

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PCR技术扩增DNA，需要的条件是
①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶 ⑤mRNA ⑥核糖体[ ]
A．①②③④
B．②③④⑤
C．①③④⑤
D．①②③⑥

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在基因工程中，把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)，放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是

[ ]

A．540个
B．7560个
C．8100个
D．17280个

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近十年来，PCR技术(聚合酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图所示)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)加热使DNA双链打开，这一步是打开_____键，称为______，在细胞中是在______酶的作用下进行的。
(2)当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成两个DNA分子，此过程中原料是__________，遵循的原则是_________________。
(3)“PCR”技术的必需条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还有三个条件，即液体环境、适宜的______和______。
(4)通过“PCR”技术使DNA分子大量复制，若将一个用¹⁵N标记的DNA分子放入试管中，以¹⁴N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制4次之后，则¹⁵N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为______。

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