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题目
题型:北京高考真题难度:来源:
T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代)。
(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除_____,因为后者产生的____会抑制侧芽的生长。
(2)为筛选出已转化的个体,需将T1代播种在含_____的培养基上生长,成熟后自交,收获种子(称为T2代)。
(3)为筛选出具有抗盐性状的的突变体,需将T2代播种在含____的培养基上,获得所需个体。
(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与____植株进行杂交,再自交____代后统计性状分离比。
(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性____。
(6)根据T-DNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是:提取__________植株的DNA,用限制酶处理后,再用__________将获得的DNA片段连接成环(如下图),以此为模板,从图中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_________作为引物进行扩增,得到的片段将用于获取该基因的全序列信息。
答案
(1)顶芽     生长素
(2)(一定浓度的)除草剂
(3)(一定浓度的)盐
(4)野生型    1
(5)降低
(6)突变体    DNA连接酶     B、C
核心考点
试题【T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中】;主要考察你对制备和应用固相化酶等知识点的理解。[详细]
举一反三
聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是[     ]
A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现
B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D.PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高
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PCR技术扩增DNA,需要的条件是
①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶 ⑤mRNA ⑥核糖体[     ]
A.①②③④
B.②③④⑤
C.①③④⑤
D.①②③⑥
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在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个),放入DNA扩增仪中扩增4代,那么,在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是

[     ]

A.540个
B.7560个
C.8100个
D.17280个
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近十年来,PCR技术(聚合酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如下图所示),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。
(1)加热使DNA双链打开,这一步是打开_____键,称为______,在细胞中是在______酶的作用下进行的。
(2)当温度降低时,引物与模板末端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成两个DNA分子,此过程中原料是__________,遵循的原则是_________________。
(3)“PCR”技术的必需条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还有三个条件,即液体环境、适宜的______和______。
(4)通过“PCR”技术使DNA分子大量复制,若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中,以14N标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制4次之后,则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为______。
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PCR技术是在生物体外复制特定DNA片段的技术,该技术的操作步骤依次是[     ]
A.高温变性、中温延伸、低温复性
B.高温变性、低温复性、中温延伸
C.中温延伸、高温变性、低温复性
D.中温延伸、低温复性、高温变性
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