题目

农杆菌质粒
转化拟南芥等用的农杆菌中,其自身含有几个质粒,大小分别是?
我将PBI121为骨架的载体转入农杆菌后,提质粒大小不对,而且有两条带.
疑惑中...

提问时间：2021-03-27

答案

用PBI121的话应该是一般的双元载体系统.不知道你用的是什么农杆菌菌株,GV3101吗?农杆菌自带一个转染用的Ti质粒,但是我做的时候从没提出来过,Ti质粒应该很大的.
质粒大小不对,有两条带.不知道你做过重复没有.你如果不嫌麻烦可以重转一下农杆菌.也可以先做个酶切,看看酶切结果是不是正确.有的时候在菌里面同一个质粒的构像不一致就会跑出两条带,不过会挨得很近.酶切之后通常大小和带数就正确了.琼脂糖电泳就是这样!