题目

生物化学推断题,求推断过程.谢谢
有一小肽,用以下试剂进行处理,得到相应的产物,请推理出此小肽的一级结构.
1、用酸彻底水解,得到Ser、Trp、Ile、Gly、Pro、Lys、Met、2Glu
2.用edman试剂处理后得到PTH-Gly
3.用胰蛋白酶处理后,释放出一个游离的氨基酸,对此氨基酸用茚三酮处理得到黄色化合物.
4.用胰凝乳蛋白酶处理后,产生两个多肽,其中一个包含三个氨基酸,用Sanger试剂处理这两个多肽,得到DNP-Gly和DNP-Glu
5.用溴化氢处理后,生成两个多肽,分别含有4个和5个氨基酸,用Sanger试剂处理这两个多肽,得到DNP-Gly和DNP-Set.彻底水解其中一个含5个氨基酸的多肽,得到Gly、Ile、Trp、Glu、高丝氨酸内酯.

提问时间：2021-03-02

答案

指出多肽是一个九肽,并指出氨基酸成分.
edman降解得到的是多肽N端的第一个残基,所以多肽N端为G
胰蛋白酶在K或R之后切割.切割之后产生一个游离氨基酸,表明此氨基酸位于K或R之后的肽链末端.能使茚三酮产生黄色反应的氨基酸只有Pro,所以末端两个残基为K/R-P,而通过1发现肽链中没有R,所以最后两个氨基酸是KP
胰凝乳蛋白酶酶切位点在F,T或Y之后,Sanger测序得到N端的残基,分别为G和E,由2知道,整个多肽的N端是G,所以酶解得到的第二个肽段的N端是E,且E前面是F/T/Y,结合1,只能是YE
溴化氰只断裂甲硫氨酸残基的羧基端肽键,产物中甲硫氨酸变成肽酰高丝氨酸内酯.
五肽中含有G,说明这是N端五个残基,又因为其中含有高丝氨酸内酯,说明五肽的最后一个是M.含有Y,E,结合4可知残基排布为GIYEM.Sanger测序表明C端四肽的首个残基是S,结合3可知C端四肽为SEKP
综上,九肽序列为GIYEMSEKP.