题目
有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因?
提问时间:2021-02-05
答案
第一个办法 ,如果你有这个载体的通用引物,可以用这俩通用引物做PCR,然后电泳观察条带的大小,如果条带和你的mRNA的大小相近(应该是略大于mRNA的,因为带有了小部分的载体序列),那就说明这里边是插入目的基因的.
第二个办法,如果你能知道这个基因插入位点的酶切位点是什么的话,可以做双酶切来做鉴定,之后跑电泳看切出来的条带大小是否符合,注意如果切得完全的话应该是两条带,后边较大的是载体,前边的是你的mRNA.
如果没有通用引物但是有这个mRNA的两端引物,有人可以用这俩引物来PCR,但是这个方法不推荐,因为可能有没连接进去的rna污染会出现假阳性,因此一般还要配合酶切鉴定.
第二个办法,如果你能知道这个基因插入位点的酶切位点是什么的话,可以做双酶切来做鉴定,之后跑电泳看切出来的条带大小是否符合,注意如果切得完全的话应该是两条带,后边较大的是载体,前边的是你的mRNA.
如果没有通用引物但是有这个mRNA的两端引物,有人可以用这俩引物来PCR,但是这个方法不推荐,因为可能有没连接进去的rna污染会出现假阳性,因此一般还要配合酶切鉴定.
举一反三
已知函数f(x)=x,g(x)=alnx,a∈R.若曲线y=f(x)与曲线y=g(x)相交,且在交点处有相同的切线,求a的值和该切线方程.
我想写一篇关于奥巴马的演讲的文章,写哪一篇好呢?为什么好
奥巴马演讲不用看稿子.为什么中国领导演讲要看?
想找英语初三上学期的首字母填空练习……
英语翻译
最新试题
热门考点
- 1某企业存入银行甲、乙两种不同性质用途的存款共20万元,甲种存款的年利率为5.5%,乙种存款的年利率为4.5%,各种存款均以年息的20%上交利息税,一年后企业获得利息的实际收入为7600元,
- 2含s,z iz发音的英语单词
- 3把质量为200g的铅加热到98度,然后投入到温度为12度的80g水中,混合后水的温度升高了6度,
- 4评论一本书 等 英文作文
- 5以下属于液化现象的是:
- 6如何让自己的英语成绩提高上去我先初一
- 7函数f(x)=x3-ax2 a(a>0)的极大值为正数,极小值为负数,求a的取值范围
- 8观察下列数字的排列157 ,65,27,11,5,( )括号内填入合适的数
- 9已知椭圆C的中心在原点,焦点在x轴上,求以下问题.
- 10科学课程的教学策略是什么?