题目

博凌科为TRIpure LS Reagent 血液（血液样本）RNA抽提试剂提取DNA时,血液样品如何保存?提取步骤是怎样的

提问时间：2021-01-13

答案

博凌科为TRIpure LS Reagent 血液（血液样本）RNA抽提试剂
TRIpure LS Reagent试剂是直接从来源于人,动物、植物,酵母,细菌和病毒的液体样品中提取总RNA的试剂.在提取血液等液体样品的RNA时按一定体积比加入该试剂即可.省去了在处理样品前离心去除液体的步骤.
使用该试剂可以同时提取DNA及蛋白质.提取的RNA样品可以用于后继的RT-PCR、Northern blot、dot杂交及体外转录等实验.回收的DNA片段可以用于PCR反应.

血液样品的保存：
为了保证提取效果,请选择新鲜的血液进行RNA的提取.在收集到血液样品后,需要加入抗凝剂.抗凝剂的选择首选EDTA,其他抗凝剂如：柠檬酸盐、肝素或者ACD也可以使用.加入抗凝剂的血液样品最好在几个小时内进行RNA提取实验.不同种类的mRNA,其半衰期也不尽相同.调控基因的mRNA的半衰期比看家基因mRNA的半衰期要短.因此,为了保证所提取的RNA能够包含更全面的信息,请尽量避免使用保存时间过长的血液进行RNA的提取.

基本步骤：
◆ 按照3：1的体积比例加入TRIpure LS reagent和待提取的液体样品(固体样品用水调整体积比至3：1）振荡混匀.
◆ 加入氯仿帮助有机相和水相分层.
◆ 异丙醇沉淀RNA.
◆ 漂洗RNA沉淀.
◆ RNase-free H2O重新溶解RNA沉淀.

注：本产品不需要进行红细胞裂解的步骤,更快,纯度高.
产品特点：
◆ 方便--- 不需要分离红细胞和白细胞
不需要进行另外的红细胞裂解步骤.

保存条件：
2-8℃　避光保存一年.

提取范围：
血液、血清、血浆、病毒培养液以及任何液体形式的样品中提取RNA.

产量：
每1ml液体样品或1mg组织或1×106培养细胞预期的RNA产量
1.人和动物全血,15～20μg
2.人淋巴细胞（约7×107白细胞）,60～70μg
3.肝和脾,6～10μg
4.肾,3～4μg
5.骨骼肌和脑组织,1～1.5μg
6.胎盘,1～4μg
7.上皮细胞(1×106 cultured cells),8～15μg
8.纤维母细胞(1×106 cultured cells),5～7μg