题目

PCR产物为什么会出现100~200bp的条带
我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有很明显的条带,共两条,类似于RNA,但从1.5ml的液体培养基中只取了3ul菌液进行菌落PCR,原菌中所带来的RNA应该不多,且PCR105℃的热盖也应将RNA降解掉了.200bp条带为何物,是如何来的?

提问时间：2021-01-07

答案

你的目的片段长度为500bp,而你的电泳图谱显示是750bp;你对电泳图谱750bp的片段是认可的,也就是说除去目的片段500bp,还有150bp的引物及其他序列；而你的杂带大小平均恰好是150bp,也就是除去150bp的引物及其他序列,应...