题目

5、 如何克隆抗生素生物合成基因?6、 基因工程在抗生素生产中有哪些应用?

提问时间：2021-01-02

答案

在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法.常含有目的基因,用体外***方法将它们插入克隆载体,形成***克隆载体,通过转化与转导的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增.
克隆(clone,clon)一词源于希腊文Klon,原意为树木的枝条.在生物学中其名词含义系指一个细胞或个体以无性繁殖的方式产生一群细胞或一群个体,在不发生突变的情况下,具有完全相同的遗传性状,常称无性繁殖(细胞)系；其动词(clone,cloned,cloning)含义指在生物体外用***技术将特定基因插入载体分子中,即分子克隆技术.
将DNA片段(或基因)与载体DNA分子共价连接,然后引入寄主细胞,再筛选获得***的克隆,按克隆的目的可分为DNA和cDNA克隆两类.
cDNA克隆是以mRNA为原材料,经体外反转录合成互补的DNA(cDNA),再与载体DNA分子连接引入寄主细胞.每一cDNA反映一种mRNA的结构,cDNA克隆的分布也反映了mRNA的分布.特点是：
①有些生物,如RNA病毒没有DNA,只能用cDNA克隆；
②cDNA克隆易筛选,因为cDNA库中不包含非结构基因的克隆,而且每一cDNA克隆只含一个mRNA的信息；
③cDNA能在细菌中表达.cDNA仅代表某一发育阶段表达出来的遗传信息,只有基因文库才包含一个生物的完整遗传信息.