题目

高效液相色谱中理论塔板数的计算方法

提问时间：2021-01-02

答案

♁理论塔板数（theoretical plate number,N）用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效）.
N取决于固定相的种类、性质（粒度、粒径分布等）、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质.如果峰形对称并符合正态分布,N可近似表示为：
N=（tR/σ）2=16(tR)2/W =5.54(tR/W1/2)2
W：峰宽 ； σ：曲线拐点处峰宽的一半,即峰高0.607处峰宽的一半.
N为常量时,W随tR成正比例变化.在一张多组分色谱图上,如果各组份含量相当,则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽,峰高则逐渐降低.
用半峰宽计算理论塔板数比用峰宽计算更为方便和常用,因为半峰宽更容易准确测定,尤其是对稍有拖尾的峰.
N与柱长成正比,柱越长,N越大.用N表示柱效时应注明柱长,如果未注明,则表示柱长为1米时的理论塔板数.（一般HPLC柱的N在1000以上.）
若用调整保留时间（tR’）计算理论塔板数,所得值称为有效理论塔板数（N有效或Neff）=16(tR’/W)2
♁理论塔板高度（theortical plate height,H）每单位柱长的方差.H=.实际应用时往往用柱长L和理论塔板数计算：H=L/N
在实际应用中能达到分离完全就可以了,塔板数超过会增加试验的时间,试验效率就会降低.