题目
什么是蛋白质测定的Lowry法?
提问时间:2020-12-10
答案
就是Folin---酚法测定蛋白质含量
原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下,易被酚类化合物还原而呈蓝色反应.蛋白质中含有代酚基的酪氨酸,故有此反应.Folin---酚法的灵敏度是双缩脲法的100倍.
试剂:一:1,4%碳酸钠;2,0.2N氢氧化钠;3,1%硫酸铜;4,2%酒石酸钾钠.1和2等体积混合,3和4等体积混合,然后将两液以50:1混合(甲).当天使用.二:1NFolin--酚试剂(乙).
方法:标准曲线;试管中加0、0.2、0.40、0.60、1.00毫升酪蛋白溶液(500微克/毫升),加水补足1毫升,平行做两份.按序各加5毫升试剂(甲),摇匀,室温置放10分钟,再依次加入1N(0.5毫升)Folin----酚试剂(乙),摇匀,30摄氏度保温30分钟.然后在分光光度机上比色测定(A500).待测样品如上反应和测定,对照标准曲线,得出含量.
注意:酚和柠檬酸对测定有干扰,低浓度尿素,胍,硫酸钠,硝酸钠,三氯乙烯,乙醇,乙醚,丙酮对显色无影响.
原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下,易被酚类化合物还原而呈蓝色反应.蛋白质中含有代酚基的酪氨酸,故有此反应.Folin---酚法的灵敏度是双缩脲法的100倍.
试剂:一:1,4%碳酸钠;2,0.2N氢氧化钠;3,1%硫酸铜;4,2%酒石酸钾钠.1和2等体积混合,3和4等体积混合,然后将两液以50:1混合(甲).当天使用.二:1NFolin--酚试剂(乙).
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注意:酚和柠檬酸对测定有干扰,低浓度尿素,胍,硫酸钠,硝酸钠,三氯乙烯,乙醇,乙醚,丙酮对显色无影响.
举一反三
已知函数f(x)=x,g(x)=alnx,a∈R.若曲线y=f(x)与曲线y=g(x)相交,且在交点处有相同的切线,求a的值和该切线方程.
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