题目

快速鉴别动物dna的详细办法与步骤

提问时间：2020-11-11

答案

DNA的鉴定一般用两种试剂：甲基绿和二苯胺
甲基绿—哌洛宁对DNA和RNA有选择性的染色效果.碱性的甲基绿-哌洛宁混合染料处理细胞后,由于DNA、RNA对染料具有的亲和力不同, 而使这两种染料对两类核酸具有了选择性. DNA被甲基绿染成绿色,RNA被哌洛宁染成红色, 这样就能使细胞中两种核酸分布显示出来.
二苯胺法的原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(溶液呈浅蓝色).
至于步骤,我以鸡为例,简单说下吧
（1）应用低渗原理和机械搅拌使细胞破裂并过滤.本步骤直接决定提取的核物质的多少及实验结果.教师应给予非常关注.
（2）溶解细胞核内DNA.加2 mol/L的NaCl溶液并用玻棒搅拌.
（3）析出DNA黏稠物并过滤.关键步骤：注意①注蒸馏水要慢,防过量而使DNA重新溶解（把握浓度达0.14 mol/L）.②轻轻沿同一方向搅拌,有利于DNA析出、附着、缠绕.
（4）再溶解DNA黏稠物并过滤.用浓度为2 mol/L的NaCl溶液.
（5）提取含杂质较少的DNA.用预冷的95%的酒精.因其①可抑制核酸水解酶活性,防止降解.②降低分子运动,易析出沉淀.③低温利于增加DNA柔韧性,减少断裂