题目

请问如何用分光光度计测定溶液的成分
最好能定量测定
我这里是722型的分光光度计

提问时间：2020-11-02

答案

722型分光光度计的使用方法
一、 测量原理
分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律：当容液中的物质在光的照射和激发下,产生了对光吸收的效应.但物质对光的吸收是有选择性的,各种不同的物质都有其各自的吸收光谱.所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时,溶液对光的吸收程度A与溶液的浓度c（g/l）或液层厚度b(cm)成正比.其定律表达式A=abc
（a是比例系数）.当c的单位为mol/l时,比例系数用ε表示,则A=εbc称为摩尔吸光系数.其单位为L·mol-1·cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数.
T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=K·C·L(比色皿的厚度)
测定时,入射光I,
吸光系数和溶液的光径长度不变时,透过光是根据溶液的浓度而变化的,即“K”为常数.比色皿厚度一定,“L”、“I0”也一定.只要测出A即可算出“C”.
《分光光度计的表头上,一行是透光率,一行是吸光度.》
二、 722型分光光度计的使用
1、将灵敏度旋钮调至“1”档（信号放大倍率最小）.
2、开启电源,指示灯亮 ,选择开关置于“T”,波长调至到测试用波长.仪器预热20分钟.
3、打开试样室（光门自动关闭）,调节透光率零点旋钮,使数字显示为000.0.（调节100%T旋钮）,盖上试样室盖,将比色皿
架处于蒸馏水校正位置,使光电管受光,调节透光率100%旋钮使数字显示100.0.如显示不到100.0,则可适当增加微电流放大的倍数.（增加灵敏度
的档数同时应重复（3）调节仪器透光率的“0”位）但尽量使倍率置于低档使用.这样仪器会有更高的稳定性.
4、预热后,按（3）连续几次调整透光率的“0”位和“100%”的位置,待稳定后仪器可进行测定工作.
三、 吸光度“A”的测量
将选择开关置于A .调节吸光度调零旋钮,使得数字显示为零,然后将被测样品移入光路,显示值即为被测样品的吸光度值.
四、 浓度c的测量
将选择开关由“A”旋至“C”将已标定浓度的样品放入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路即可读出被测样品的浓度值.
注意事项：
1、测量完毕,速将暗盒盖打开,关闭电源开关,将灵敏度旋钮调至最低档,取出比色皿,将装有硅胶的干燥剂袋放入暗盒内,关上盖子,将比色皿中的溶液倒入烧杯中,用蒸馏水洗净后放回比色皿盒内.
2、每台仪器所配套的比色皿不可与其它仪器上的表面皿单个调换.
使用方法
（1）预热仪器 将选择开关置于“T”,打开电源开关,使仪器预热20分钟.为了防止光电管疲劳,不要连续光照,预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开,使光路切断.
（2）选定波长 根据实验要求,转动波长手轮,调至所需要的单色波长.
（3）固定灵敏度档 在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下,尽可能采用灵敏度较低的挡,使用时,首先调到“1”挡,灵敏度不够时再逐渐升高.但换挡改变灵敏度后,须重新校正“0%”和“100%”.选好的灵敏度,实验过程中不要再变动.
（4）调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮,使数字显示为“00.0”,（此时试样室是打开的）.
（5）调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液,或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内,并对准光路,把试样室盖子轻轻盖上,调节透过率“100%”旋钮,使数字显示正好为“100.0”.
（6）吸光度的测定 将选择开关置于“A”,盖上试样室盖子,将空白液置于光路中,调节吸光度调节旋钮,使数字显示为“.000”.将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格内,盖上试样室盖,轻轻拉动试样架拉手,使待测溶液进入光路,此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值.读数后,打开试样室盖,切断光路.
重复上述测定操作1-2次,读取相应的吸光度值,取平均值.
（7）浓度的测定 选择开关由“A”旋置“C”,将已标定浓度的样品放入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路,此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值.
（8）关机 实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架用软纸擦净.