题目

MS固体培养基的制作流程

提问时间：2020-10-23

答案

一、实验所需的仪器设备和用具.
二、实验安排与要求：将全班若干小组（6-7人）,每小组配制500 mlMS固体培养基,
三、边示范边讲解实验方法和步骤
1、计算并填写培养基成分单
计算公式：∨母液＝∨配制÷母液倍数
∨激素＝∨配制×培养基中所要求的激素浓度÷激素母液浓度
2.每组取500ml的烧杯一只,加300ml蒸馏水,用天平称4g琼脂放入蒸馏水中,在电炉上加热溶解.称15g蔗糖放入溶解的琼脂中.
3.按配方取出各种母液,放入到溶解后的琼脂和蔗糖溶液中,用玻璃棒搅动混合,并加蒸馏水定容至500ml.
4.用1mol/L的NaOH或1mol/LHCL将PH值调至5.8,可用PH精密试纸或酸度计测定.
5.用培养基分装用具将500ml的培养基分注于15个所选用的培养瓶中.
6.用封口膜、棉塞或其它封口物包扎瓶口,并做好标记.
7.把分装好的培养基及所需灭菌的各种用具、蒸馏水等,放入高压灭菌锅的消毒桶内,将外层锅内加水至水位线.盖好锅盖,上好螺丝,接通电源升温.待锅内温度达100.C（0.05kgf/cm2或0.005MPa）左右时,打开排气阀排净锅内冷空气,然后关闭排气阀,继续加热至温度达到121.C（1.05kgf/cm2或0.103MPa）时,维持20~30min即可切断电源,让锅内气压自然下降,当压力降到零点后,打开排气阀,排出剩余蒸汽,再打开锅盖取出培养基及灭菌物品.
8.培养基及灭菌物品在室温下自然冷却后,存放于阴凉干燥洁净处待用.
四、总结高压蒸汽灭菌的原理和一般操作步骤实验