题目

如何从土壤中分离得到一株可以产生某种从未被发现的新的抗生素的放线菌?
最好能设计一个实验~

提问时间：2020-10-23

答案

是这样的,放线菌好分离,因为每一株都有可能带有某种从未被发现的新的抗生素,难得是后面的检测抗生素的过程.
连续稀释分离法
①取1克土样,在火焰旁放入装有99毫克无菌水的锥形瓶内,充分摇匀,将菌分散.
②用移液管吸取上述菌悬液1毫升,放入盛有9毫升无菌水的试管中,并进一步稀释成1000倍,即10-3的菌悬液.按10倍稀释法连续稀释到10-8（每1次稀释,都须更换移液管）.
③取3支1毫升移液管分别从10-8、10-7、10-6菌悬液中吸取1毫升菌悬液,分别注入编号10-8、10-7和10-6的培养皿内,同一稀释液重复做3个培养皿.
④将温度为45～50℃的营养琼脂培养基（其成分和配制方法见本章第三节）倒入上述各培养皿内,轻轻旋转使菌悬液充分混合均匀,凝固后,将培养皿倒扣放置在温暖处（28℃左右）,每天观察培养基表面有无微生物菌落.
⑤经过一定时间培养后,培养基上长出菌落,根据菌落特征,初步判断属于何种类型的微生物,并在显微镜下检查,若菌体形态一致,则可认为是初步分离到纯菌种放线菌.
⑥将分离培养所得的纯菌种,从平板培养基转移到试管斜面培养基上培养.
平板划线分离法
①取1克土样,在火焰旁加进装有99毫升无菌水的锥形瓶中,堵塞棉塞,制成菌悬液待用.
②取一培养皿置于实验台上,左手将培养皿打开稍许,向培养皿内注入熔化的营养固体培养基10～12毫升,轻轻转动培养皿,使其中的培养基分布均匀,平放桌上,使其凝成平板.然后在皿底用蜡笔划分A、B、C、D几个区.应连续制作几份平板培养基.
③将培养皿底部用姆指和无名指固定成倾斜状态,在火焰旁将培养皿稍微打开.在此同时,用环状接种针在火焰旁取少许菌悬液,迅速送入培养皿内,在平板培养基的一边,作第1次平行划线 7条,转动培养皿约70°角,用烧过冷却的接种针,通过第1次划线部分作第2次平行划线,然后再用同样方法,作第3次平行划线.划线时,应使平板培养基表面向下,以免空气中杂菌落入.接种针应与平板表面成30°角左右.不要使接种针碰到培养皿边缘,也不要将培养基划破.
④将划线后的培养皿倒放在28℃左右的温暖处进行培养,待长出菌落后,鉴定微生物类群,并根据镜检结果,判断是否已分离到了纯菌种.如果菌种很纯,则可转移到斜面培养基上进一步培养.
连续稀释分离法和平板划线法,均须在无菌室或接种箱内进行.
注：如果菌落的硬度较大,干燥致密,且与基质紧密结合,不易被针挑起,这就是放线菌菌落.