题目

如何将分子量相同的单链DNA与单链RNA分开
其中有一个答案是加碱来区分.DNA可以被分离出来,为什么?

提问时间：2020-08-07

答案

用化学方法水解核酸能够得到什么产物取决于核酸分子中磷酸二酯键和N-糖苷键对酸、碱的相对稳定性.
RNA中,核糖与碱基之间的N-糖苷键对碱稳定,RNA主链中的磷酸二酯键一般也对碱稳定,因此RNA通常应该不被水解.但是,RNA分子由于核糖上有2′-羟基,存在邻接基团参与效应,在碱催化下,RNA分子中的磷酰基发生转移,生成2′,3′-环状单核苷酸中间产物,环核苷酸再进一步水解成2′-核苷酸和3′-核苷酸.DNA则一般不被碱水解.
碱水解RNA时,A、C、G、U、I、T的单核甘酸和几种甲基化碱基是稳定的,m1A转变为m6A,m3C转变为m3U,而m7G、m1I、tC6A、m6tC8A会被碱破坏.修饰组分2′-O-甲基核糖核苷酸由于不能形成2′,3′-环核苷酸,因此该处的磷酸二酸键不被碱水解,产物中出现NmNp和NmNmNp等寡核苷酸.大肠杆菌16S rRNA中的m62Am62Ap也有很强的抗碱性,用1mol∕L NaOH,37℃水解9小时后仍有38%残存,而通常RNA用0.3mol∕L NaOH,37℃作用18小时即可完全水解.