题目

测定蛋白质分子量的技术体系有：a凝胶过滤层析 b SDS-PAGE c d免疫电泳e等电聚焦电泳

提问时间：2020-07-24

答案

a,b,c
凝胶过滤层析中,分子量越大的蛋白流出的越快.（用一系列已知分子量的标准品放入同一凝胶柱内,在同一条件下层析,记录每一分钟成分的洗脱体积,并以洗脱体积对分子量的对数作图,在一定分子量范围内可得一直线,即分子量的标准曲线.测定未知物质的分子量时,可将此样品加在测定了标准曲线的凝胶柱内洗肿后,根据物质的洗脱体积,在标准曲线上查出它的的分子量.）
SDS-PAGE电泳,因为蛋白经过SDS变性,基本上形状和所带电荷都类似,因此迁移率之和大小有关.（SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构.而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂.在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异.）
生物质谱,可以测量生物分子的核质比.（质谱分析是一种测量离子荷质比（电荷-质量比）的分析方法,其基本原理 Joseph John Thomson是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带正电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器.在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量.）
免疫电泳利用抗原抗体反应的特异性,与分子量大小无关
等电聚焦电泳利用不同蛋白等电点不同