题目

CTAB 法提取DNA的原理和步骤?

提问时间：2020-07-23

答案

1）取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5 ml Eppendorf管中；
（2）加入800 μl的CTAB提取缓冲液,混匀（CTAB在65℃水浴预热）,每5min轻轻震荡几次,20min后12000 r/min,离心15 min；
（3）小心吸取上清液,加入等体积的酚：氯仿（各400μl）溶液,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min；
（4）小心吸取上清液,加入等体积的氯仿,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min.
（5）重复步骤（4）1-2次,以蛋白层不出现为止；
（6）取上清,-20℃沉淀1h,4℃,12000 r/min,离心10 min；
（7）弃去上清液,用70%乙醇洗涤沉淀2次；
（8）室温下干燥后（一般干燥5-15 min）,溶于30-50 μl DEPC去离子水中,于-20℃或者-70℃下保存备用.