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题目
题型:浙江省期末题难度:来源:
大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的1acZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果IacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠 杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题:
(1)作为受体大肠杆菌应________,以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,并加入_________。
(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入_______等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果:
①._______________________________________________________________________。
②._______________________________________________________________________。
答案
(1)不含氨苄青霉索抗性基因(或对氨苄青霉素敏感)     在试管Ⅰ中制备好的DNA
(2)IPTG、X-gal、氨苄青霉素
(3)①.如果长出蓝色菌落,说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体菌,但目的基因没有接人运载体(或说明重组质粒没导人受体大肠杆菌)     ②.如果长出白色菌落,说明重组质粒已导入受体大肠杆菌 
核心考点
试题【大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的1acZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中】;主要考察你对PCR技术的基本操作和应用等知识点的理解。[详细]
举一反三
现有一长度为3000碱基对(bp)的线性DNA分子,用限制性核酸内切酶酶切后,进行凝胶电泳,使降解产物分开。用酶H单独酶切,结果如图甲。用酶B单独酶切,结果如图乙。用酶H和酶B同时酶切,结果如图丙。该DNA分子的结构及其酶切图谱是
[     ]
A.
B.
C.
D.
题型:湖南省模拟题难度:| 查看答案
2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个“融合基因”,再将该融合基因转入真核生物细胞内,表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。下列关于该过程的叙述中,正确的是[     ]
A.可以采用两种或两种以上的限制性内切酶分别同时切割运载体和含目的基因的DNA
B.构建的基因表达载体可以让目的基因进入受体细胞而不被受体细胞内核酸酶降解
C.导人受体细胞内的“融合基因”可视为一个独立的遗传单位
D.利用该技术可以追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
题型:江苏模拟题难度:| 查看答案
基因敲除是根据DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段,从而达到基因敲除的目的。运用基因敲除技术构建基因敲除动物模型是研究基因功能中较为普遍的一种方法,其基本原理如下图所示。
请回答下列问题:
(1)在将目的基因导人受体细胞前,需要构建一个基因表达载体。一个理想的基因表达载体,通常由启动子、终止子、目的基因和_______等四部分组成。在此过程中,所需使用的相关工具酶是________。
(2)如果要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞通常为____,基因导人该细胞时,可以采用____等方法。
(3)上述途径所获得的动物,其后代并非每一个个体都含目的基因,原因是____________。
(4)假设通过基因敲除构建了一个非球形红细胞性贫血(Ⅱ型)模型动物,该动物因丙酮酸激酶缺陷或葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺陷,使红细胞膜变化引起红细胞自溶现象,但若向该动物注射ATP后,自溶现象可明显降低。由此可表明,基因对生物性状的控制方式之一是:_______________。
(5)某实验小组向正常小鼠胚胎细胞内导入某“X基因”后,发现靶基因能正常转录形成mRNA,但细胞内却不再合成相应蛋白质,其原因最可能是_____________。
题型:江苏模拟题难度:| 查看答案
养蚕人喜欢多养雄蚕,是因为雄蚕比雌蚕产丝量多,而消耗的桑叶又比雌蚕少。有人设想将海蜇的一种绿色荧光蛋白基因导入雌蚕体内,这样在幼虫刚从卵中孵化出时即可选出雄性幼虫来饲养,从而提高蚕丝产量。据此,请回答下列问题: (1)假定已经得到少量海蜇绿色荧光蛋白基因,并知道该基因两端的一部分核苷酸序列,则可以利用_____技术来扩增并获取该基因。该项技术中需要用到的酶是___________________。
(2)将绿色荧光蛋白基因导入雌蚕体内的基本过程是:
①.用同一种_______酶同时处理运载体和绿色荧光蛋白基因,构建基因表达载体;
②.采用______技术将基因表达载体转入到从雌蚕体内获取的一个体细胞核中,再通过细胞核____获取含有绿色荧光蛋白基因且全能性好的重组细胞(相当于受精卵);
③.重组细胞经过培育获得能育的在紫外线下发出绿色荧光的雌蚕。为了在家蚕的后代中能较快的区分出雌雄虫,应将绿色荧光蛋白基因导人并整合到_______染色体上(蚕的性别决定类型为zw型,即雌蚕的性染色体为zw,雄蚕的性染色体为zz)。
题型:安徽省模拟题难度:| 查看答案
下图表示叶片的光合作用强度与植物周围空气中的CO2浓度的关系,ce段是增大了光照强度后测得的曲线。请回答:
(1)影响图中曲线ab段和bc段叶片光合作用强度的要环境因素分别是_______和_______。 
(2)如在e点后再次增大光照强度,则曲线能否持续上升?_______,原因是_______。
(3)为提高农作物的产量,除提高光合作用效率外,还需提高作物的抗寒抗逆性。研究发现在某些深海鱼中存在抗冻蛋白基因afp,对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值,通过基因工程可以将抗冻蛋白基凶afp导入植物细胞从而提高抗寒能力。该基因工程的核心步骤是________,利用_______技术可以获得大量目的基因。将目的基因导入植物细胞最常采用的方法是___________。
题型:安徽省模拟题难度:| 查看答案
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