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题目

题型：山西省模拟题难度：来源：

下图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因。tetR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答：

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有________、_______、_______三种。若要从这些连接产物中分离出***质粒，需要对这些连接产物进行___________。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有___________。
(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是，其合成的产物是_____________。
(4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是________________。

答案

(1)目的基因和载体连接物载体和载体连接物目的基因和目的基因连接物分离、纯化(或筛选)
(2)载体和载体连接物目的基因和载体连接物、载体和载体连接物
(3)启动子 mRNA
(4)EcoRⅠ和BamHⅠ

核心考点

试题【下图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因。tetR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终】；主要考察你对PCR技术的基本操作和应用等知识点的理解。[详细]

举一反三

下图为科学家通过基因工程方法培育转基因抗虫棉的大致过程。请据图分析回答：

(1)图中①过程需要的酶有__________，图中A的组成，除了目的基因外，还必须有_______和复制原点。
(2)农杆菌中的Ti质粒上T-DNA具有__________的特点。图中②过程的方法称为_________。
(3)目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是____________，检测时常采用的方法是___________。
(4)图中③过程常采用的生物技术是___________，此技术首先需通过细胞的__________过程，培养出__________，然后经再分化形成小植株，其原理是_________。
(5)图中③过程培育到____________，将其包上人工种皮，可制成神奇的人工种子。

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一位科学家正在使用氨苄青霉素敏感型菌株进行研究，该菌株不能利用乳糖，这是因为它的乳糖操纵基因异常。该科学家有两种质粒，一种含有正常的乳糖操纵基因，另一种含有氨苄青霉素抗性基因。她运用限制酶和DNA连接酶，获得了一些含有这两个基因的***质粒。然后在一个仅以葡萄糖为唯一能源的培养基中培养该细菌，并向其中加入高浓度的***质粒，使细菌增殖。再将实验组细菌(含***质粒)和对照组细菌(不含***质粒)放入表1所示环境中让其生长。请回答下列问题：

(1)在基因工程的基本操作程序中，___________是基因工程的核心。限制酶是基因工程中常用的工具，若要提取限制酶，可选择的生物是__________(举出一例)。本实验中使用限制酶的作用是：__________。
(2)在以葡萄糖为唯一能源的培养基中加入高浓度的质粒，为了促进细菌更好的吸收***质粒，还应用______处理细菌，使细菌处于_______。该培养基以葡萄糖为能源是因为_________。
(3)若没有新的突变发生，细菌最有可能在哪些培养基上生长出菌落____________。
A．只有1，2和4号 B．只有3，5和6号 C．只有1，2，3和4号 D．只有4，5和6号
(4)如果在准备制作***质粒时未使用DNA连接酶，则细菌最可能在________号和_______号平板上长出菌落。
(5)若该科学家用该培养基进行另一项实验如表2，在该培养基中用乳糖为唯一能源，则细菌能在哪一培养基中长出菌落_____________。
A．只有10号 B．只有8号 C．7和8号 D．8利10号

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利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需的产品。下列选项中能说明目的基因完成表达的是[ ]
A．棉花细胞中检测到载体上的标记基因
B．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素的基因
C．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因的mRNA
D．酵母菌细胞中提取到人的干扰素

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(选做题)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

(1)获得耐盐基因后，构建***DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的__________处，DNA连接酶作用于_______处。(填“a”或“b”)
(2)将***DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和__________法。
(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用_________技术，该技术的核心是__________和___________。
(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_________做探针进行分子杂交检测，又要用_____________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

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(选做题)继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：
(1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是__________。
(2)进行基因转移时，通常要将外源基因转入_________中，原因是____________。
(3)通常采用____________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。
(4)在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的____________细胞中特异表达。
(5)为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的_________转入_________细胞中构成***细胞，使其发育成供体具有相同性状的个体。该技术称为_____________。

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