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题目
题型:海南省高考真题难度:来源:
(选做题)下图为某种质粒表到载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tctR为四环素抗性基因,P启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答:

(1)将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有__________、_________、__________三种。若要从这些连接产物中分离出***质粒,需要对这些连接产物进行_____________。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_____________;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物____________。
(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是__________,其合成的产物是____________。
(4)在上述实验中,为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是_____________。

答案
(1)目的基因--载体连接物    载体--载体连接物   目的基因--目的基因连接物   分离纯化(答案合理即可)
(2)载体--载体连接物   目的基因--载体连接物、载体--载体连接物
(3)启动子     mRNA
(4)EcoRⅠ和BamHⅠ
核心考点
试题【(选做题)下图为某种质粒表到载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tctR为四环素抗性基因,P启动子】;主要考察你对PCR技术的基本操作和应用等知识点的理解。[详细]
举一反三
人体细胞内含有抑制癌症发生的P53基因,生物技术可对此类基因的变化进行检测。
(1)目的基因的获取方法通常包括________和________。
(2)上图表示从正常人和患者体内获取的P53基因的部分区域。与正常人相比,患者在该区域的碱基会发生改变,在上图中用方框圈出发生改编的碱基对,这种变异被称为________。
(3)已知限制酶E识别序列为CCGG,若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的P53基因部分区域(见上图),那么正常人的会被切成________个片段,而患者的则被切割成长度为________对碱基和________对碱基的两种片段。
(4)如果某人的P53基因部分区域经限制酶E完全切割后,共出现170、220、290和460碱基对的四种片段,那么该人的基因型是________(以P+表示正常基因,Pn表示异常基因)。
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(选做题)农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因,现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花,培育抗病棉花品系。请回答下列问题。
(1)要获得该抗病基因,可采用_____________、____________等方法。为了能把该抗病基因转入到棉花细胞中,常用的载体是____________。
(2)要使载体与该抗病基因连接,首先应使用__________进行切割。假如载体被切割后,得到的分子末端序列为,则能与该载体连接的抗病基因分子末端是____________。
 A.  B. C. D.
(3)切割完成后,采用__________酶将载体与该抗病基因连接,连接后得到的DNA分子称为___________。
(4)再将连接得到的DNA分子导入农杆菌,然后用该农杆菌去___________棉花细胞,利用植物细胞具有的________性进行组织培养,从培养出的植株中_____________出抗病的棉花。
(5)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是___________。
A.淀粉 B.脂类 C.蛋白质 D.核酸
(6)转基因棉花获得的_____________是由该表达产物来体现的。
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基因工程又叫基因拼接技术。
(1)在该技术中,用人工合成方法获得目的基因的途径之一是:以目的基因转录的________为模板,__________成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成___________。
(2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、____________。若将真核基因在原核细胞中表达,对该目的基因的基本要求是___________。
(3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体,并以同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因,将切割后的运载体与目的基因片段混合,并加入DNA连接酶。连接产物至少有___________种环状DNA分子,它们分别是______________。
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植物学家在培育抗虫棉时,对目的基因作了适当的修饰,使得目的基因在棉花植株的整个生长发育期都表达,以防止害虫侵害。这种对目的基因所作的修饰发生在[     ]
A.内含子
B.外显子
C.编码区
D.非编码区
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基因疫苗(又称DNA疫苗)是目前发展最快、备受人们重视的一个研究领域。1990年Wolff等在进行基因治疗实验时,以裸DNA注射作对照,结果意外发现裸DNA可被骨骼肌细胞吸收并表达出外源性蛋白。1992年Tang等首次证明经基因免疫产生的外源性蛋白质可刺激小鼠免疫系统产生特异性抗体,从而宣告基因疫苗的诞生。基因疫苗的作用原理见下图。其中①表示抗原,②③表示某种物质,④⑤代表某种细胞。
据图回答下列问题。
(1)细胞④⑤分别代表________;细胞④在①的刺激下分泌的物质②是________;③能特异性的识别①,③是________;呈递抗原的细胞是________。
(2)抗原基因在体内持续______________,不断刺激机体的免疫系统产生________________,免疫效果可靠。
(3)抗体产生后可以和病原体结合,从而抑制病原体的____________________。效应T细胞清除被病原体感染的细胞是通过________(填细胞器)完成的。
(4)请简述如何实现一种基因疫苗可预防多种疾病。____________________________。
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